Abstracto

Proteína superóxido dismutasa extracelular en la diabetes

Mohammed El-Lakany

 La diabetes se caracteriza por una hiperglucemia crónica, que puede aumentar la producción de especies reactivas de oxígeno (ROS) por la cadena de transporte de electrones mitocondrial. La formación de ROS induce estrés oxidativo y activa genes inductores de daño oxidativo en las células. No se han publicado investigaciones sobre los niveles de proteína superóxido dismutasa extracelular (EC-SOD) relacionada con el daño oxidativo en la piel humana diabética. Investigamos la expresión de EC-SOD en piel diabética en comparación con tejido cutáneo normal in vivo. La expresión de la proteína EC-SOD se evaluó mediante transferencia Western en 6 muestras de tejido cutáneo diabético y 6 muestras de piel normal. También se realizó una tinción inmunohistoquímica para confirmar el nivel de expresión de EC-SOD en las 6 muestras de tejido cutáneo diabético. La diabetes es una enfermedad crítica que prevalece en toda la población mundial. El daño que causa surge de una serie de mecanismos patológicos, incluido el estrés oxidativo. El estrés oxidativo es causado por una cascada de especies reactivas de oxígeno (ROS) liberadas de las mitocondrias, un proceso relacionado con la diabetes tipo 1, que es inducida por la apoptosis de las células beta pancreáticas, y la diabetes tipo 2, que es inducida por la resistencia a la insulina. Las ROS y el daño oxidativo resultante están estrechamente correlacionados con la patogénesis y las complicaciones de la diabetes. Los niveles fisiológicamente equilibrados de ROS están involucrados en la señalización celular y la protección contra varios patógenos. Una concentración desregulada de ROS puede contribuir al desarrollo de una amplia gama de enfermedades humanas, como diabetes, cáncer, hipertensión, aterosclerosis y envejecimiento prematuro. La evidencia indica el papel crucial del estrés oxidativo en la lesión tisular relacionada con la diabetes. El aumento de la resistencia a la insulina y la respuesta secretora de insulina reducida inducen una tolerancia alterada a la glucosa, lo que conduce al estrés oxidativo por la producción de niveles más altos de ROS. Las ROS juegan un papel importante en la activación de las vías de señalización de respuesta al estrés que regulan la expresión de genes responsables del daño celular. Aunque las células tienen una amplia gama de mecanismos de defensa contra los radicales libres, estos últimos pasan por alto los sistemas de defensa y atacan y modifican los componentes subcelulares, incluidas las proteínas, los lípidos y los ácidos nucleicos. Las proteínas son un objetivo destacado de los radicales libres de oxígeno y otras especies reactivas. Las superóxido dismutasas (SOD) son la primera y más importante línea de sistemas de defensa antioxidante contra las ROS, en particular los radicales aniónicos superóxido. Entre las isoenzimas de la SOD, la superóxido dismutasa extracelular (ECSOD) fue descubierta más recientemente y es el principal mecanismo de defensa contra el daño mediado por superóxido tanto a la superficie celular como a las proteínas de la matriz extracelular. Kimura et al. informaron de una correlación positiva entre los niveles séricos de EC-SOD y la gravedad de las complicaciones vasculares en la diabetes. Sin embargo, se sabe poco sobre el papel de la EC-SOD en la piel diabética in vivo. El objetivo de este estudio fue investigar la expresión de la EC-SOD in vivo.Planteamos la hipótesis de que la expresión de la proteína EC-SOD será menor en el tejido cutáneo diabético que en el tejido cutáneo normal. Estudiamos la expresión de EC-SOD en tejidos cutáneos normales y tejidos cutáneos diabéticos mediante transferencia Western e inmunoquímica. El Comité de Revisión Institucional de un hospital universitario de Seúl, Corea, revisó y aprobó este protocolo de investigación que implica el uso de muestras de tejido. Se obtuvieron un total de 6 muestras de tejido cutáneo normal y 6 muestras de piel diabética de pacientes que se sometieron a cirugía entre diciembre de 2012 y enero de 2013 en el Departamento de Cirugía Plástica y Reconstructiva del mismo hospital universitario. Se obtuvo el consentimiento informado de los pacientes antes de la cirugía. Los tejidos cutáneos normales se recogieron de la espalda de 6 mujeres que se sometieron a una reconstrucción mamaria mediante el procedimiento de colgajo de dorsal ancho. Las muestras de piel diabética se obtuvieron de pacientes que se sometieron a una cirugía de amputación. Una parte de las muestras se congeló en nitrógeno líquido inmediatamente después de la resección para el análisis mediante transferencia Western y se almacenó a -80 °C. Para los estudios inmunohistoquímicos, se utilizaron las muestras almacenadas fijadas con formalina e incluidas en parafina, incluidos los 6 tejidos de piel diabética y 6 tejidos de piel normal. La Junta de Revisión Institucional de un hospital universitario en Seúl, Corea, revisó y aprobó este protocolo de investigación que involucra el uso de muestras de tejido. Se obtuvieron un total de 6 muestras de tejido de piel normal y 6 muestras de piel diabética de pacientes que se sometieron a cirugía entre diciembre de 2012 y enero de 2013 en el Departamento de Cirugía Plástica y Reconstructiva del mismo hospital universitario. Se obtuvo el consentimiento informado de los pacientes antes de la cirugía. Los tejidos de piel normal se recolectaron de la espalda de 6 mujeres que se sometieron a reconstrucción mamaria mediante el procedimiento de colgajo de dorsal ancho. Las muestras de piel diabética se obtuvieron de pacientes sometidos a cirugía de amputación. Una parte de las muestras se congeló en nitrógeno líquido inmediatamente después de la resección para el análisis de transferencia Western y se almacenó a -80 °C. Para los estudios inmunohistoquímicos se utilizaron muestras fijadas en formalina e incluidas en parafina, que incluían los 6 tejidos de piel diabética y los 6 tejidos de piel normal. La abundancia relativa de la expresión de proteínas de cada muestra se analizó mediante el software Phosphor-Imager.Se obtuvo el consentimiento informado de los pacientes antes de la cirugía. Los tejidos de piel normal se recogieron de la espalda de 6 mujeres que se habían sometido a una reconstrucción mamaria mediante el procedimiento de colgajo del dorsal ancho. Se obtuvieron muestras de piel diabética de pacientes que se sometieron a una cirugía de amputación. Una parte de las muestras se congeló en nitrógeno líquido inmediatamente después de la resección para el análisis de transferencia Western y se almacenó a -80 °C. Para los estudios inmunohistoquímicos, se utilizaron las muestras almacenadas fijadas con formalina e incluidas en parafina, incluidos los 6 tejidos de piel diabética y 6 tejidos de piel normal. La Junta de Revisión Institucional de un hospital universitario en Seúl, Corea, revisó y aprobó este protocolo de investigación que implica el uso de muestras de tejido. Se obtuvo un total de 6 muestras de tejido de piel normal y 6 muestras de piel diabética de pacientes que se sometieron a cirugía entre diciembre de 2012 y enero de 2013 en el Departamento de Cirugía Plástica y Reconstructiva del mismo hospital universitario. Se obtuvo el consentimiento informado de los pacientes antes de la cirugía. Los tejidos de piel normal se obtuvieron de la espalda de 6 mujeres que se habían sometido a una reconstrucción mamaria mediante el procedimiento de colgajo del dorsal ancho. Las muestras de piel diabética se obtuvieron de pacientes que se sometieron a una cirugía de amputación. Una parte de las muestras se congeló en nitrógeno líquido inmediatamente después de la resección para el análisis de transferencia Western y se almacenó a -80 °C. Para los estudios inmunohistoquímicos, se utilizaron las muestras almacenadas fijadas con formalina e incluidas en parafina, incluidos los 6 tejidos de piel diabética y los 6 tejidos de piel normal. La abundancia relativa de la expresión de proteínas de cada muestra se analizó mediante el software Phosphor-Imager.Se obtuvo el consentimiento informado de los pacientes antes de la cirugía. Los tejidos de piel normal se recogieron de la espalda de 6 mujeres que se habían sometido a una reconstrucción mamaria mediante el procedimiento de colgajo del dorsal ancho. Se obtuvieron muestras de piel diabética de pacientes que se sometieron a una cirugía de amputación. Una parte de las muestras se congeló en nitrógeno líquido inmediatamente después de la resección para el análisis de transferencia Western y se almacenó a -80 °C. Para los estudios inmunohistoquímicos, se utilizaron las muestras almacenadas fijadas con formalina e incluidas en parafina, incluidos los 6 tejidos de piel diabética y 6 tejidos de piel normal. La Junta de Revisión Institucional de un hospital universitario en Seúl, Corea, revisó y aprobó este protocolo de investigación que implica el uso de muestras de tejido. Se obtuvo un total de 6 muestras de tejido de piel normal y 6 muestras de piel diabética de pacientes que se sometieron a cirugía entre diciembre de 2012 y enero de 2013 en el Departamento de Cirugía Plástica y Reconstructiva del mismo hospital universitario. Se obtuvo el consentimiento informado de los pacientes antes de la cirugía. Los tejidos de piel normal se obtuvieron de la espalda de 6 mujeres que se habían sometido a una reconstrucción mamaria mediante el procedimiento de colgajo del dorsal ancho. Las muestras de piel diabética se obtuvieron de pacientes que se sometieron a una cirugía de amputación. Una parte de las muestras se congeló en nitrógeno líquido inmediatamente después de la resección para el análisis de transferencia Western y se almacenó a -80 °C. Para los estudios inmunohistoquímicos, se utilizaron las muestras almacenadas fijadas con formalina e incluidas en parafina, incluidos los 6 tejidos de piel diabética y los 6 tejidos de piel normal. La abundancia relativa de la expresión de proteínas de cada muestra se analizó mediante el software Phosphor-Imager.y se almacenaron a -80°. Para los estudios inmunohistoquímicos, se utilizaron las muestras almacenadas, fijadas en formalina e incluidas en parafina, que incluían los 6 tejidos de piel diabética y los 6 tejidos de piel normal. La abundancia relativa de la expresión de proteínas de cada muestra se analizó mediante el software Phosphor-Imager.y se almacenaron a -80°. Para los estudios inmunohistoquímicos, se utilizaron las muestras almacenadas, fijadas en formalina e incluidas en parafina, que incluían los 6 tejidos de piel diabética y los 6 tejidos de piel normal. La abundancia relativa de la expresión de proteínas de cada muestra se analizó mediante el software Phosphor-Imager.